Le cortisol est sécrété par les glandes surrénales sous le contrôle de l’axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien. La mesure du cortisol dans le sang contribue au dépistage et au diagnostic de l’hyperadrénocorticisme (syndrome de Cushing) et de l’hypoadrénocorticisme (maladie d’Addison) chez  le chien.

Les concentrations de cortisol sont mesurées en nmol/l.
Plage dynamique : 30 nmol/l à 800 nmol/l.

ÉCHANTILLON
- Utiliser uniquement du sérum. Ne pas utiliser de sang total ou de plasma.
- Aucune interférence avec l’hémolyse ou l’hyperlipémie n’a été mise en évidence.
- Si le test n’est pas effectué dans l’heure, transférer le sérum dans un tube sec.

Sérum :
· Conservation des échantillons de sérum jusqu’à 7 jours : conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C.
· Au-delà de 7 jours, conserver le sérum au congélateur (à -20 °C).
- Les échantillons doivent être à température ambiante (entre 18 °C et 27 °C) et centrifugés avant analyse.
- La présence de filaments de fibrine dans l’échantillon peut donner lieu à des résultats de dosage erronés induits par l’obstruction de la pipette et du volume réduit d’échantillon aspiré. Dans ce cas, centrifuger une nouvelle fois l’échantillon.

UTILISATION ADÉQUATE DE LA PIPETTE
- Toujours maintenir la pipette, les tubes d’échantillon et les réactifs en position verticale pour garantir un volume correct de prélèvement.
- Utiliser un nouvel embout de pipette à usage unique pour chaque test.
- Maintenir le piston de la pipette enfoncé et introduire l’embout dans l’échantillon, en prenant soin de ne pas toucher les parois du tube. Relâcher lentement le piston de la pipette tout en maintenant l’extrémité de l’embout dans l’échantillon. 
- Extraire la pipette du tube d’échantillon et veiller à ce qu’il n’y ait pas de bulles d’air dans l’embout. S’il y en a, jeter l’échantillon et répéter le prélèvement.

MELANGE DU RÉACTIF ET DE L’ÉCHANTILLON
- Pour obtenir une migration correcte de l’échantillon, placer la cellule test sur une surface horizontale.
- Le tube de réactif contient une quantité standard de réactif. Toute altération de cette quantité peut se solder par des résultats de dosage erronés. 
- Ne pas conserver le mélange pour une analyse ultérieure.

RECOMMANDATIONS

- Avant d'utiliser le premier test de chaque boîte, enregistrer la puce de calibration de lot dans le SPEED READER®.
- Le spécimen et tout le matériel utilisé pour la procédure de test doivent être considérés comme potentiellement infectieux et doivent être mis au rebut conformément aux réglementations locales.
- Utiliser des équipements de protection appropriés et propres (gants et blouse).
- En cas de contact du réactif avec la peau ou les yeux, rincer immédiatement à l'eau claire et prendre contact avec un médecin.

PROTOCOLE OPÉRATOIRE
- Ne pas mélanger les cellules test, les tubes de réactif et les puces de calibration de lots différents.
- Laisser le réactif et la cellule test atteindre la température ambiante (entre 18 °C et 27 °C) pendant au moins 30 minutes avant utilisation.

MATÉRIEL POUR CHAQUE TEST
1 cellule test, 1 tube de réactif, 1 bouchon compte-gouttes, 1 embout de pipette et la pipette de 50 μl.

PRÉPARATION DU SPEED READER®
- Appuyer sur "Nouveau Test" sur l'écran principal avant de démarrer la procédure de test.
- Suivre les instructions à l'écran.

TRANSFERT DE L’ÉCHANTILLON
- Avec l’extrémité du bouchon compte-gouttes, perforer la feuille d’aluminium pour ouvrir le tube de réactif. 
- Poser un nouvel embout jetable sur la pipette.
- Transférer 50 μl de l’échantillon dans le tube de réactif en suivant les instructions visant à utiliser la pipette correctement. 
- Refermer soigneusement le tube de réactif avec le bouchon compte-gouttes.
- Mélanger doucement le contenu en retournant le tube au moins 5 fois. NE PAS SECOUER.
- Laisser le mélange échantillon / réactif reposer pendant 5 minutes. Il est important de respecter le délai exact de cette étape. Au bout de 5 minutes, utiliser le mélange échantillon / réactif immédiatement.

APPLICATION DE L’ÉCHANTILLON
- Enlever l’opercule en plastique du bouchon compte-gouttes et jeter les 2 premières gouttes du mélange pour éliminer le volume mort du bouchon compte-gouttes.
-  Retirer complètement la cassette du SPEED READER® et ajouter 2 gouttes du mélange dans le puits échantillon de la cellule test.

LECTURE
- Insérer la cellule test dans le chargeur de cassette du SPEED READER® quand l’analyseur vous y invite dans le sens indiqué par la flèche (le puits échantillon en premier) et suivre les instructions à l’écran. 
- Lire le résultat à l’écran.

BIOMARQUEUR SPEED™ CORTISOL est un test immunochromatographique, quantitatif et rapide qui permet de doser le cortisol circulant grâce à une analyse par fluorescence induite par laser.

BIOMARQUEUR SPEED™ CORTISOL ne peut pas être interprété visuellement et se lit uniquement au moyen d’un analyseur SPEED READER®. Pour consulter les instructions complètes, consulter le manuel d’utilisation de l’analyseur SPEED READER®.