Une grande variabilité individuelle complique les prévisions d'insémination : 20% des chiennes ovulent ≪en dehors≫ de la période comprise entre le 10ème et le 14ème jour des chaleurs. Ainsi, le frottis vaginal, et le dosage de la progestérone permettent de programmer la saillie ou l’insémination pour avoir un résultat optimal.
Le taux de progestérone est faible avant l’ovulation. Au moment du pic de LH, la concentration de progestérone circulante va progressivement augmenter et atteindre 5 à 10 ng/ml au moment de l’ovulation. 

La concentration de progestérone est mesurée en ng/ml, entre 1 ng/ml et 20 ng/ml.

ÉCHANTILLON
- Utiliser uniquement des échantillons de sérum ou de plasma (héparine-li.). Ne pas utiliser de sang total ou de plasma EDTA.
- Ne pas utiliser de tube de prélèvement à gel de séparation.
- Aucune interférence avec l’hémolyse n'a été mise en évidence.
- Les échantillons fortement lipémiques peuvent affecter les résultats. Il est recommandé de laisser l'animal à jeun 6 heures avant le prélèvement pour limiter l'hyperlipémie.
- Si le test n’est pas effectué dans l’heure, transvaser le sérum ou le plasma dans un tube sec.
- Conservation des échantillons jusqu’à 72 heures : conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C.
- Au-delà de 72 heures, conserver le sérum ou le plasma au congélateur (à -20 °C).
- Les échantillons doivent être à température ambiante (entre 18 °C et 27 °C) et centrifugés avant analyse.
- La présence de filaments de fibrine dans l’échantillon peut donner lieu à des résultats de dosage erronés induits par l’obstruction de la pipette et du volume réduit d’échantillon aspiré. Dans ce cas, centrifuger une nouvelle fois l’échantillon.

UTILISATION ADÉQUATE DE LA PIPETTE
- Toujours maintenir la pipette, les tubes d’échantillon et les réactifs en position verticale pour garantir un volume correct de prélèvement.
- Utiliser un nouvel embout de pipette à usage unique pour chaque test.
- Maintenir le piston de la pipette enfoncé et introduire l’embout dans l’échantillon. Relâcher lentement le piston de la pipette tout en maintenant l’extrémité de l’embout dans l’échantillon.
- Extraire la pipette du tube d’échantillon et veiller à ce qu’il n’y ait pas de bulles d’air dans l’embout. S’il y en a, jeter l’échantillon et répéter le prélèvement.

MÉLANGE DU RÉACTIF ET DE L’ÉCHANTILLON
- Pour obtenir une migration correcte de l’échantillon, placer la cellule test sur une surface horizontale
- Le tube de réactif contient une quantité standard de réactif. Toute altération de cette quantité peut se solder par des résultats de dosage erronés.
- Utiliser le mélange échantillon / réactif juste après reconstitution.
- Ne pas conserver le mélange pour une analyse ultérieure.

RECOMMANDATIONS
- Avant d’utiliser le premier test de chaque boîte, enregistrer la puce de calibration de lot dans le SPEED READER®
- Le spécimen et tout le matériel utilisé pour la procédure de test doivent être considérés comme potentiellement infectieux et doivent être mis au rebut conformément aux réglementations locales.
- Utiliser des équipements de protection appropriés et propres (gants et blouse)
- En cas de contact du réactif avec la peau ou les yeux, rincer immédiatement à l’eau claire et prendre contact avec un médecin.

PROTOCOLE OPÉRATOIRE
- Ne pas mélanger les cellules test, les tubes de réactif et les puces de calibration de lots différents.
- Laisser le réactif et la cellule test atteindre la température ambiante (entre 18 °C et 27 °C) pendant au moins 30 minutes avant utilisation.

MATÉRIEL POUR CHAQUE TEST
1 cellule test, 1 tube de réactif, 1 bouchon compte-gouttes, 1 embout de pipette et la pipette de 100 µl.

PRÉPARATION DU SPEED READER®
- Appuyer sur "Nouveau Test" sur l'écran principal avant de démarrer la procédure de test.
- Suivre les instructions à l'écran.

TRANSFERT DE L’ÉCHANTILLON
- Avec l’extrémité du bouchon compte-gouttes, perforer la feuille d’aluminium pour ouvrir le tube de réactif.
- Poser un nouvel embout jetable sur la pipette.
- Transférer 100 μl de l’échantillon dans le tube de réactif en suivant les instructions visant à utiliser la pipette correctement. 
- Refermer soigneusement le tube de réactif avec le bouchon compte-gouttes.
- Mélanger doucement le contenu en retournant le tube au moins 5 fois. NE PAS SECOUER.

APPLICATION DE L’ÉCHANTILLON
- Enlever l’opercule en plastique du bouchon compte-gouttes et jeter les 2 premières gouttes du mélange pour éliminer le volume mort du bouchon compte-gouttes.
- Retirer complètement la cassette du SPEED READER® et ajouter 2 gouttes du mélange dans le puits échantillon de la cellule test

LECTURE
- Insérer la cellule test dans le chargeur de cassette du SPEED READER® quand l'analyseur vous y invite, dans le sens indiqué par la flèche (le puits échantillon en premier) et suivre les instructions à l'écran.
- Lire le résultat à l'écran.

BIOMARQUEUR SPEED™ PROGESTERONE est un test immunochromatographique, quantitatif et rapide qui permet de doser la progestérone circulante grâce à une analyse par fluorescence induite par laser.

BIOMARQUEUR SPEED™ PROGESTERONE ne peut pas être interprété visuellement et se lit uniquement au moyen d'un analyseur SPEED READER®. Pour consulter les instructions complètes, consulter le manuel d'utilisation de l'analyseur SPEED READER®.

Chaque boîte contient :

• - Tests (6)
• - Embouts de pipettes (10)
• - Flacons de réactif (6)
• - Bouchons compte goutte (6)
• - Puce de calibration (1)