Informations générales :

Le test Vetscan Rapid Mastigram+ est un kit de test de diagnostic in vitro destiné à la détection de bactéries à Gram positif dans le lait provenant de quartiers individuels sur des vaches présentant une mammite. Les bactéries à Gram positif cibles comprennent :

1. Streptococcus uberis

2. Streptococcus agalactiae

3. Streptococcus dysgalactiae

4. Staphylococcus aureus

5. Staphylococcus chromogenes*

6. Staphylococcus epidermidis*

7. Staphylococcus haemolyticus*

8. Staphylococcus simulans*

9. Staphylococcus xylosus*

10. Staphylococcus hyicus*

* Staphylocoques non aureus

Principes du test :

Le test Vetscan Rapid Mastigram+ est un test immunochromatographique sur bandelette. 

Dans un échantillon positif, les bactéries à Gram positif cibles formeront des complexes anticorps-antigènes avec l’anticorps monoclonal à Gram positif conjugué à l’or. Les complexes migrent le long de la bandelette de test et sont capturés sur une ligne de réaction sensibilisée où leur accumulation se traduit par une ligne de test rose visible (T). 

La formation d’une ligne de contrôle (C) garantit que le test est valide.

• Ne pas utiliser ce kit ou l’un de ses composants après la date de péremption.
• Le kit doit être conservé à une température de 2 à 8 °C. Les composants du kit ne doivent pas être congelés.
• Manipuler l’échantillon de lait provenant de quartiers infectés de la même façon que du matériel biologiquement dangereux.
• Porter des vêtements de protection appropriés.
• Suivre les protocoles en utilisant des techniques de laboratoire appropriées.
• Ne pas contaminer le bouillon d’enrichissement.
• Garder la boîte de bandelettes réactives fermée, sauf au moment du retrait des bandelettes réactives.
• Utiliser la bandelette réactive immédiatement après l’avoir retirée de la boîte (dans les 10 minutes). La bandelette réactive doit être à température ambiante avant d’effectuer le test dans l’étape B.
• Manipuler la bandelette réactive en la tenant par sa partie supérieure étiquetée. Éviter tout contact avec la surface de la bandelette réactive.
• Éviter la contamination de la bandelette réactive lors de son retrait de la boîte.

• Utiliser une pipette différente pour chaque échantillon.
• Tenir les pipettes verticalement lors de la distribution de l’échantillon.
• Éliminer le contenu/récipient conformément aux réglementations locales/régionales/nationales/internationales.
• À usage vétérinaire exclusivement.

Processus d’enrichissement des échantillons

1. Amener l’échantillon de lait (réfrigéré) à température ambiante pendant au moins 1 heure, ou le placer dans l’incubateur à 37 °C pendant 30 à 40 minutes avant de commencer l’enrichissement.
2. À l’aide d’une pipette de transfert stérile, aspirer l’échantillon de lait jusqu’à la marque 1 mL. Éviter les caillots et prélever uniquement la partie liquide.
3. Verser immédiatement l’échantillon dans le flacon d’enrichissement contenant 1 mL de bouillon et étiqueter le flacon. Utiliser une nouvelle pipette de transfert pour chaque nouvel échantillon.
4. Placer l’échantillon enrichi dans l’incubateur à 37 °C (tolérance 34–40 °C) pendant 7 à 7½ heures. Tester l’échantillon enrichi dans les 30 minutes suivant sa sortie de l’incubateur.

Protocole pour la bandelette réactive

1. Retirer l’échantillon enrichi de l’incubateur et étiqueter le tube à essai.
2. Verser l’échantillon enrichi dans le tube à essai. Utiliser une nouvelle pipette de transfert pour chaque échantillon.
3. Ouvrir le récipient et retirer la bandelette réactive.
4. Tenir la bandelette par le haut et immerger le tampon de prélèvement dans le tube à essai.
5. Retirer la bandelette et lire les résultats dans un délai maximum de 10 minutes.

Lecture et interprétation des résultats

Fenêtre de lecture : une seule ligne de contrôle (C) visible avant 10 minutes ne signifie pas que le test est terminé ; la ligne de test (T) peut apparaître après la ligne de contrôle. Lire dans la fenêtre recommandée (≤ 10 minutes).

Validation :

• Valide : une ligne de contrôle (C) rose est présente.
• Invalide : absence de ligne de contrôle (C). Le test doit être répété.

Interprétation :

• Positif : lignes C et T visibles. Même une ligne T faible avec une ligne C valide indique un résultat positif.
• Négatif : seule la ligne C est visible.
• Toujours interpréter en tenant compte des informations cliniques disponibles pour la vache testée.

Sécurité et remarques

• Utiliser une pipette de transfert neuve pour chaque échantillon.
• Éviter les caillots ; ne prélever que la partie liquide.
• Tester l’échantillon enrichi dans les 30 minutes après incubation.
• Température d’incubation recommandée : 37 °C (tolérance 34–40 °C).
• Temps d’incubation : 7 à 7½ heures.